免费真实播放国产乱子伦,亚洲欧美一级久久精品,乌克兰极品少妇XXXX做受,午夜免费福利视频

銷售熱線

19126518388
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 制備YAC DNA進(jìn)行Southern印跡分析

    制備YAC DNA進(jìn)行Southern印跡分析

    發(fā)布時(shí)間: 2021-12-24  點(diǎn)擊次數(shù): 851次

    材料與儀器

    酵母菌
    AHC SCE SCEM Tris·Cl EDTA TE 乙酸甲 RNase A 異丙醇 NaCl
    培養(yǎng)箱 離心管 轉(zhuǎn)子

    步驟


    1.  接種一個(gè)紅色的含YAC克隆的酵母菌落于盛有20 ml AHC培養(yǎng)基的250 ml 三角燒瓶中,在旋轉(zhuǎn)搖床上30℃ 250 r/min 振蕩培養(yǎng)24 h。
     
    2.  擴(kuò)大培養(yǎng):取1ml 由步驟1獲得的粉紅色菌懸液接種于盛有100 ml AHC培養(yǎng)基的 1 000 ml三角燒瓶中,于30℃ 250 r/min搖床培養(yǎng)24 h。

    3.  將菌懸液移入2個(gè)50 ml 的錐形離心管中,于2 000 g 離心5 min,棄上清,共用5 ml SCE緩沖液重懸菌體,并合并到一個(gè)試管中。

    4.  加1 ml SCEM緩沖液,在旋轉(zhuǎn)搖床中37℃ 100 r/min 輕搖晃混勻。

    5.  于4℃ 2 000 g 離心棄上清,菌體用5 ml Tris/EDTA裂解液重懸。

    6.  加0.5 ml 10%SDS顛倒混合數(shù)次,于65℃溫育20 min。
     
    7.  加2 ml 冰浴的5 mol/l pH4.8的乙酸甲緩沖液,顛倒混合數(shù)次后置于冰浴60 min。

    8.  于室溫2 000 g 離心10 min,小心將含核酸的上清轉(zhuǎn)移到一個(gè)新管中。加室溫2倍體積的95%乙醇,顛倒混勻。

    9.  于室溫2 000 g 離心5 min,棄上清,在室溫晾干10~15 min,分別加入3 ml TE緩沖液,pH8.0于37℃過(guò)夜溶解核酸。

    10.  加入0.1 ml 的1 mg/ml 無(wú)DNA酶活性的RNase A,于37℃溫育1 h。
     
    11.  加入6 ml 室溫的異丙醇,振蕩并顛倒混勻后用一支毛細(xì)管纏繞起染色體,然后溶于0.5 ml TE緩沖液中。

    12.  加入50 μl 5 mol/l NaCl和2 ml 95%乙醇,顛倒混勻。

    13.  再一次纏繞起染色體DNA,并溶于0.5 ml TE緩沖液中,于4℃保存?zhèn)溆谩?/div> 
    14.  取毎小份2 μg 的YAC DNA和15 μg 用以構(gòu)建YAC文庫(kù)的某物種或個(gè)體的基因組DNA。

    15.  采用幾種高頻切割的限制性內(nèi)切酶進(jìn)行酶切,接著用單拷貝探針進(jìn)行雜交和核酸印跡分析。
     
    16.   一旦通過(guò)核酸印跡實(shí)驗(yàn)確證YAC克隆,那么可通過(guò)制備染色體凝膠校塊塞和進(jìn)行脈沖電場(chǎng)凝膠電泳,來(lái)明確重組YAC的大小并對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。


    同實(shí)驗(yàn)其他方法

    YAC 克隆的分析實(shí)驗(yàn)

    1.  用接種棒將含重組載體pYAC的AB1380菌株劃線接種在AHC平板上,倒扣平板于30℃培養(yǎng),直至長(zhǎng)出1~3 mm 大小的紅色菌落為止。 2.  短期保存:用Parafilm膜將平

    以上就是本期的內(nèi)容,更多資訊,歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


    安培生物科技有限公司介紹:

    安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。


產(chǎn)品中心 Products
yellow字幕网在线91pom国产| 24小时日本在线WWW免费的| 中国少妇A片BBBBBB洗澡| 竹菊成AV人无码亚洲成AV无码| RAPPER国内女RAPPER| 重囗味另类老妇| 天天上天天干| 巨臀中文字幕一区二区视频| 少妇被多人C夜夜爽爽AV| 午夜国产理论| 国产一精品一aⅴ一免费| 狠狠亚洲狠狠欧洲2019| 亚洲一区精品中文字幕| a在线免费视频| 奇米精品一区二区三区在| 日韩成人在线视频| 2020亚洲欧美日韩在线观看| 寡妇玩XXXXXX猛男吃奶| 強姦亂倫中文字幕在線觀看| 欧洲美女x8x8免费视频| 免费视频爱爱| 日韩欧美视频在线一区二区| 久久久久久精品免费视频| 我的私人女教师3| 亚洲午夜精品专区国产| 亚洲国产剧情在线精品视| 国产麻豆一级在线观看| 一级白嫩美女毛片免费| 宫交拔不出来H| 国产精品jizz视频| 国产在视频线精品视频2021| 欧美在线视频| 国产一级一片免费播放视频| 夜干夜干2017最新网站| 高H禁伦餐桌上的肉伦NP| 男朋友一晚弄了我5次正常吗| 変态奴隷人形ひとみ调教| 对白刺激边接电话边做国产| 亚洲日本va中文字幕线| 国产亚洲大尺度无码无码专线| 亚洲日韩中文字幕无码一区|